Ген человека встроили в плазмиду внутрь гена устойчивости к тетрациклину, а ген устойчивости к ампициллину остался целым. Исходные бактерии чувствительны к обоим антибиотикам. После трансформации клетки высеяли на среду с ампициллином, а выросшие колонии методом отпечатков перенесли на среду с тетрациклином. Какие колонии содержат рекомбинантную плазмиду?
Показать ответ и разборСкрыть ответ и разбор
Верный ответ
- Dрастут с ампициллином, не растут с тетрациклином
Разбор
1) Колонии выросли на среде с ампициллином только у клеток, получивших плазмиду с целым геном устойчивости к ампициллину. Клетки без плазмиды погибают, это вариант «не растут ни с одним антибиотиком». 2) Плазмида без вставки сохраняет оба гена, поэтому такие клетки растут и с ампициллином, и с тетрациклином. 3) Если чужой ген встроен внутрь гена устойчивости к тетрациклину, этот ген разрушен (инсерционная инактивация), и клетки теряют устойчивость к тетрациклину. 4) Значит, рекомбинантную плазмиду содержат колонии, которые растут с ампициллином, но не растут с тетрациклином. Вариант «не растут с ампициллином, растут с тетрациклином» невозможен: ген ampR остаётся целым, а без плазмиды нет устойчивости ни к одному антибиотику.